Diagnosis of goat tuberculosis using tuberculinization and molecular techniques

Tuberculosis is an infectious, chronic, and worldwide disease. It has been known since the beginning of humanity and still negatively influences public health and livestock, especially, in Brazil, in the northeast. Etiologic agents are the mycobacteria of the Mycobacterium tuberculosis complex, which is the most important in mammals' involvement. The state of Bahia has 68.7% of its territory located in the semiarid region and holds the largest goat herd in the country. Goat breeding is a social and economic activity that adds value to this region. Up to the present, data on goat tuberculosis is unknown in this state. Thus, this study seeks data on tuberculosis prevalence in goats in a semiarid region of Bahia by using the comparative tuberculin test and multiplex polymerase chain reaction (PCR). A total of 600 adult animals of both sexes were evaluated. A prevalence of 0.33% (2/600) and 33.33% (1/3) properties were found for positive animals. Each assessed property had a questionnaire to analyze the epidemiological data management and relevant aspects for the disease occurrence. To confirm the positive tuberculin test results, PCR was used to detect and identify the pathogenic mycobacteria involved in the infection. It is concluded that most of the properties performing goat breeding in the region show low technification levels and promote farming between different species. Low prevalence of the disease alerts preventive measures to avoid major proportion situations that could influence the goat breeding in the state.

Conidiobolomycosis in goats / Conidiobolomicose em caprinos

The present article presents cases of conidiobolomycosis in adult goats with clinical signs characterized by serous nasal discharge, dyspnea, apathy, and weight loss. Two goats were necropsied. Necropsy displayed increased volume on the sagittal section of the head and an ulcerated surface containing a yellow friable mass with irregular and granular consistency in the nasal septum and in the ventral nasal turbinate. One goat also presented lesions on the ear's skin and the right pelvic limb. Microscopically, lesions were characterized by multifocal granulomas with a central necrotic area containing non-stained fungal hyphae images surrounded by a granulomatous infiltrate. Samples of the lesions examined by immunohistochemistry and polymerase chain reaction were positive for Conidiobolus lamprauges. This is the first report of conidiobolomycosis in goats, and the disease should be considered in the differential diagnoses for rhinitis and dermatitis in goats.(AU)

O presente artigo apresenta casos de conidiobolomicose em cabras adultas com sinais clínicos caracterizados por secreção nasal serosa, dispneia, apatia e perda de peso. Dois caprinos foram necropsiados. Na necropsia, em corte sagital da cabeça, foi observado aumento de volume e superfície ulcerada contendo massa amarela e friável com consistência irregular e granular no septo nasal e conchas nasais ventrais. Uma cabra apresentou também lesões na pele da orelha e no membro pélvico direito. Microscopicamente, as lesões foram caracterizadas por granulomas multifocais com área central de necrose, contendo imagens de hifas fúngicas não coradas, circundadas por infiltrado inflamatório granulomatoso. Amostras das lesões submetidas à imuno-histoquímica e reação em cadeia da polimerase foram positivas para Conidiobolus lamprauges. Este é o primeiro registro de conidiobolomicose em caprinos e deve ser considerado no diagnóstico diferencial de rinite e dermatite em caprinos.(AU)

Atividade antibacteriana de nanopartículas de polipirrol diante de Staphylococcus aureus isolados de amostras de leite de vacas e cabras com mastite / Antibacterial behavior of polypyrrole nanoparticles against Staphylococcus aureus isolated from cows and goats with mastitis

The aim of the present study was to evaluate the antibacterial behavior of polypyrrole nanoparticles (PPy-NPs) in water against biofilm producer or not S. aureus isolated from cows and goats with mastitis. One hundred and thirty-eight isolates of S. aureus were initially evaluated for biofilm formation by spectrophotometry in microplates. In addition, the minimum inhibition concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of PPy-NPs in water for planktonic S. aureus were determined. From the bovine samples analyzed, 5 (4.46%) S. aureus isolates showed a strong biofilm production, 17 (15.18%) moderate production, 36 (32.14%) with weak production and 54 (48.21%) did not produce biofilms. Strains from goats (26) showed no biofilm production in 18 (69.23%) strains and weak biofilm production in 8 (30.76%) strains. The MIC and MBC of S. aureus to PPy-NPs were found in the same concentration (125搭/mL) in all strains tested, regardless of biofilm production or not. This finding provides a new insight into the interaction between PPy-NPs and S. aureus, and will offer potential benefits for the control of mastitis.(AU)

Seroprevalence of toxoplasma gondii infection in goats in the five northwestern provinces of China / Seroprevalência de infecção por toxoplasma gonddi em cabras nas cinco províncias do noroeste da China

O objetivo do presente estudo foi investigar a soroprevalência de infecção com Toxoplasma gondii (T. gondii) em cabras em cinco províncias do noroeste da China. Soroprevalência foi determinado usando o kit de teste de ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA). A soroprevalência geral foi 21.23% (197/928). Análise estatística revlou que diferenças significativas foram observadas em fêmeas (P= 0.048, OR= 0.567, 95% CI= 0.309 a 1.041) e nos grupos ≥ 2 (P= 0.002, OR= 0.330, 95% CI= 0.224 a 0.488). Nenhuma diferença estatisticamente significativa foi observada entre diferentes províncias. Nossos resultados indicam que a infecção com T. gondii, que pode ter implicações importantes sobre a saúde pública, teve diferenças significativas em sexo e idade, mas nenhuma significância foi observada em diferentes regiões. Além disto, nossos resultados também indicam que infecção por T. gondii em cabras é generalizada nas cinco províncias do noroeste.(AU)

Antimicrobial activity of propolis extract fractions against Staphylococcus spp. isolated from goat mastitis / Atividade antimicrobiana de frações do extrato de própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de mastite caprina

The indiscriminate use of antibiotics in the treatment of caprine mastitis causes the appearance of resistant microorganisms, besides leaving residues in milk, putting at risk to human health. In this way, propolis is an alternative in the treatment of diseases because it has antimicrobial activity, mainly because of the presence of flavonoids in its composition. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial potential of propolis to Staphylococcus spp. Isolated from cases of goat mastitis and qualify the crude ethanoic extract by high performance liquid chromatography (HPLC). In this study, the minimum bactericidal concentration values of propolis extracts in ethanol, ethyl acetate and hexane showed that the best concentrations capable of promoting the highest mortality of the isolates of Staphylococcus spp. from mastitis in goats, were 6250, 3125 and 1562.5µg/mL, respectively. By the microplate adherence test, it was found that 20.78% isolates were not able to form biofilm, 14.70% were classified as moderate and 64.70% were weak and none as a strong biofilm producer. Propolis in its different diluents was able to affect the formation of biofilm and showed a pronounced marked antimicrobial activity against Staphylococcus spp. strains and may be indicated for use in in vivo studies.(AU)

O uso indiscriminado de antibióticos no tratamento de mastite caprina leva ao desenvolvimento de micro-organismos resistentes que poderão estar presentes em alimentos, colocando em risco a saúde humana. Dessa forma, a própolis surge como uma alternativa para o tratamento de doenças por possuir uma ação antimicrobiana, principalmente pela presença de flavonoides em sua composição. O objetivo desse estudo foi avaliar o potencial antimicrobiano da própolis frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite caprina e qualificar o extrato etanoico bruto por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE-DAD). Neste estudo, os valores de concentração bactericida mínima (CBM) dos extratos de própolis em álcool etílico, acetato de etila e hexano nos isolados foram de 6250, 3125 e 1562,5µg/mL, respectivamente. Pelo teste de aderência à microplacas, observou-se que 20,78% dos microorganismos, não foram capazes de formar biofilme, 14,70% foram classificados como moderados, 64,70% em fracos e nenhum como forte produtor de biofilme. A própolis em seus diferentes diluentes foi capaz de afetar a formação de biofilme e apresentou significativa atividade antimicrobiana frente a cepas de Staphylococcus spp., podendo ser indicada para utilização em estudos "in vivo".(AU)

Ocurrence and risk factors associated with Mycoplasma agalactiae infection in dairy goat herds of Paraíba State, Brazil / Ocorrência e fatores de risco associados à infecção por Mycoplasma agalactiae em rebanhos caprinos leiteiros do estado da Paraíba, Brasil

Mycoplasmosis is a disease that may cause severe economical losses in goat and sheep herds, and it is associated with mastitis, polyarthritis, agalactia, conjunctivitis, pneumonia and reproductive failure. The objective of this study was to determine the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples and investigate the main risk factors associated with infection in goats from farms of the state of Paraíba, Brazil. For Mycoplasma agalactiae diagnosis, 251 milk samples were submitted to DNA extraction using a commercially available kit, following the manufacturer's instructions and Polymerase Chain Reaction (PCR) was performed. In addition, questionnaires were applied to identify the main risk factors associated with contagious agalactia. Out of the two hundred fifty-one samples analyzed, 50 (19.9%, I.C. 15.1-25.4%) were PCR positive for M. agalactiae. In the risk factors analysis, some associations were observed for the following variables: size of the herd (P<0.001, OR=7.1, I.C. 2.4-20.6), replacement of farm animals (P<0.001, OR=4.7, I.C. 1.8-12.2) and participation of animals in fairs and exhibitions (P=0.029, OR=2.0, I.C.1.0-3.9). The results allowed confirming the occurrence of Mycoplasma agalactiae in milk samples of goats from Paraíba. Therefore, it is strictly necessary to monitor dairy goat flocks and to raise the awareness of farmers about the economic importance of the disease, since it causes severe economic losses for producers of the state. Identification of risk factors is essential for adoption of control measures and for the correction of the management factors in farms where there are animals with positive diagnosis, avoiding, so, pathogen dissemination.(AU)

As micoplasmoses ocasionam prejuízos econômicos nas criações de ovinos e caprinos, e estão associados com quadros de mastite, poliartrite, agalaxia, conjuntivite, pneumonia e falhas reprodutivas. Objetivou-se neste estudo determinar a ocorrência de Mycoplasma agalactiae em amostras de leite e investigar os principais fatores de risco associados à infecção em caprinos provenientes de propriedades rurais do estado da Paraíba, Brasil. Para o diagnóstico de Mycoplasma agalactiae, foram analisadas 251 amostras de leite, que foram submetidas à extração do DNA genômico usando um kit comercial, seguindo as recomendações do fabricante. Para diagnóstico da infecção utilizou-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Além disso, foram aplicados questionários para identificar os principais fatores de risco associados infecção à agalaxia contagiosa. Das 251 amostras analisadas, 50 (19,9%; I.C. 15,1-25,4%) foram positivas na PCR para M. agalactiae. Observaram-se na análise dos fatores de risco, algumas associações para as seguintes variáveis: tamanho do rebanho (P<0,001; OR 7,1), reposição de animais da propriedade (P<0,001; OR 4,7) e participação dos animais em feiras e exposições (P= 0,029; OR 2,0). Os resultados permitiram confirmar a ocorrência do Mycoplasma agalactiae em amostras de leite de caprinos da Paraíba. Portanto, é necessário o monitoramento dos rebanhos caprinos leiteiros e a conscientização dos produtores rurais para a importância econômica da doença, visto que a mesma acarreta severos prejuízos econômicos para os produtores do estado. A identificação dos fatores de risco são imprescindíveis para a adoção de medidas de controle e para a correção dos fatores de manejo em propriedades que tenham animais com diagnóstico positivo, evitando assim, a disseminação do patógeno.(AU)

Serological diagnosis and risk factors for Coxiella burnetii in goats and sheep in a semi-arid region of Northeastern Brazil / Diagnóstico sorológico e fatores de risco para Coxiella burnetii em caprinos e ovinos da região semiárida do nordeste do Brasil

Abstract Coxiella burnetii is a zoonotic agent transmitted mainly by small ruminants. In Brazil the disease has been classified as a notifiable disease since 2013, when human cases were reported. This study aimed to identify risk factors associated with the presence of anti- Coxiella burnetii antibodies in goats and sheep in a semiarid region of Northeastern Brazil. Sera of 412 goats and 403 sheep from municipality of Petrolina, Pernambuco, were examined by the Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) against antigens of C. burnetii. Information about management variables (independent variables) that could be associated with the presence of the microorganism (dependent variables) were obtained from the supervisor of each farm. It was determined that 2.2% (9/412) of the goats and 2.1% (9/403) of the sheep had antibodies reactive to C. burnetii. The presence of anti-C. burnetii antibodies was associated with the dry area of the Sequeiro (a region in the northern part of the municipality of Petrolina) (P = 0.025), male sheep (P = 0.020), and intensive goat breeding (P = 0.005). This study therefore showed the presence of anti-C. burnetii antibodies in goat and sheep, confirming for the first time that this agent is likely circulating among goat herds in the Caatinga Biome, semi-arid of Brazil.

Resumo Coxiella burnetii é um agente zoonótico transmitido principalmente por pequenos ruminantes. No Brasil, a doença foi classificada como de notificação compulsória desde 2013, quando casos humanos foram relatados. O objetivo deste estudo foi identificar os fatores de risco associados à presença de anticorpos anti-Coxiella burnetii em caprinos e ovinos em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Este estudo envolveu um inquérito sorológico de 412 caprinos e 403 ovinos em fazendas do município de Petrolina, no estado de Pernambuco. Os soros foram examinados pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) contra antígenos de C. burnetii . Informações sobre variáveis ​​de manejo (variáveis ​​independentes) que poderiam estar associadas à presença do microrganismo (variáveis ​​dependentes) foram obtidas do proprietário de cada fazenda. Foi determinado que 2,2% (9/412) dos caprinos e 2,1% (9/403) dos ovinos tinham anticorpos reativos a C. burnetii. A presença de anticorpos anti-C. burnetii foram associados com a área seca do Sequeiro (região no norte do município de Petrolina) (P = 0,025), ovinos machos (P = 0,020) e criação intensiva de caprinos (P = 0,005). Este estudo, portanto, observou a presença de anticorpos anti-C. burnetii em pequenos ruminantes, confirmando pela primeira vez que este agente pode estar circulando em rebanhos caprinos no bioma Caatinga, semiárido do Brasil.

Frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in milk of cows and goats with mastitis / Frequência de genes fatores de virulência de Staphylococcus aureus em leite de vacas e cabras com mastite

The present study determined the frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in 2,253 milk samples of cows (n=1000) and goats (n=1253) raised in three different geographical regions of the state Pernambuco, Brazil. The presence of genes of virulence factors associated to adhesion to host cells (fnbA, fnbB, clfA and clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla and hlb), and capsular polysaccharide (cap5 and cap8) was evaluated by PCR. A total of 123 and 27 S. aureus strains were isolated from cows' and goats' milk, respectively. The sec and tsst genes were detected exclusively in goats' isolates, while the seh gene was only identified in cows' isolates. The number of toxin genes per strain showed that goats' isolates are likely more toxic than bovines' isolates. The cap5 genotype predominated in both host species, especially in strains collected from cows raised in the Agreste region. The cap8 genotype is likely more virulent due to the number of virulence genes per strain. The results of the present study demonstrate that S. aureus may pose a potential threat to human health in Brazil, and, therefore, these results should support actions related to mastitis control programs.(AU)

O presente estudo determinou a frequência de genes de virulência de Staphylococcus aureus em 2253 amostras de leite, sendo de vacas n=1000 e de cabras n=1253, procedentes das três regiões geográficas do estado de Pernambuco, Brasil. A presença de genes de fatores de virulência associados à adesão às células hospedeiras (fnbA, fnbB, clfA e clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla e hlb) e polissacarídeo capsular (cap5 e cap8) foram avaliadas por PCR. Um total de 123 e 27 cepas de S. aureus foram isoladas do leite de vacas e cabras, respectivamente. Os genes sec e tsst foram detectados exclusivamente em isolados de cabras, enquanto o gene seh foi identificado apenas em isolados de vaca. O número de genes de toxina por cepa mostrou que os isolados de cabras são potencialmente mais tóxicos do que os isolados obtidos de bovinos. O genótipo cap5 predominou em ambas as espécies hospedeiras, especialmente em cepas coletadas de vacas criadas na região Agreste. O genótipo cap8 é potencialmente mais virulento devido ao número de genes de virulência por isolado. Os resultados do presente estudo demonstram que S. aureus pode representar uma ameaça potencial para a saúde humana no Brasil e, portanto, estes resultados devem subsidiar ações relacionadas aos programas de controle de mastite.(AU)

Catarrhal mastitis by Staphylococcus simulans in a nulliparous goat / Mastite catarral causada por Staphylococcus simulans em uma cabra nulipara

The present paper is a case report of a one-year old nulliparous Alpine Goat belonging to a dairy goat farm in semi-arid region of Brazil. Both glands were naturally infected by α-hemolytic Staphylococcus simulans and evolved similar clinical signs. The mammary glands presented an acute catarrhal mastitis with systemic clinical signs that responded positively to treatment with gentamicin associated with amoxicillin. The present report suggests the importance of the pathogenic potential of non-aureus Staphylococci strains (NAS) as a cause of clinical mastitis also in nulliparous animals. The isolate showed resistance to tetracycline and contained staphylococcal toxin production genes (sec, sec and TSST-1). Moreover, it has been reported that Staphylococcus simulans is an emerging pathogen in humans causing cutaneous and osteoarticular infections, mainly in those in close contact with farm animals. To the best of our knowledge, this is the first report of a clinical mastitis in a nulliparous goat caused by Staphylococcus simulans(AU)

O presente trabalho é o relato do caso de uma cabra nulípara da raça Parda Alpina, de um ano de idade, pertencente ao Setor de Caprinocultura da Universidade Federal da Paraíba ­ Bananeiras - Brasil. Ambas as glândulas foram naturalmente infectadas por Staphylococcus simulans α-hemolítico. As glândulas mamárias apresentaram mastite aguda catarral com envolvimento sistêmico, respondendo positivamente ao tratamento sistêmico com gentamicina associada a amoxicilina. O presente relato sugere a importância do potencial patogênico de Staphylococcus não-aureus (SNA) como causador de mastite clínica também em animais nulíparos. O isolado mostrou resistência a tetraciclina e continha genes de produção de toxinas estafilocócicas (sec, seg e TSST-1). Além disso, tem sido relatado que Staphylococcus simulans é um patógeno emergente em seres humanos causando infecções cutâneas e osteoarticulares, principalmente naqueles que têm contato íntimo com animais de fazenda. Até onde sabemos, este é o primeiro relato de uma mastite clínica em uma cabra nulípara causada por Staphylococcus simulans.(AU)

Atividade antimicrobiana in vitro do extrato etanólico bruto da folha da Hymenaea martiana Hayne frente às Staphylococcus spp. e avaliação de seu potencial como desinfetante em cabras / In vitro antimicrobial activity of ethanolic extract of Hymenaea martiana Hayne leaf on strains of Staphylococcus spp. and evaluation of its potential as a disinfectant in goats

Este estudo objetivou avaliar a ação antimicrobiana e antisséptica do extrato etanólico bruto da folha da Hymenaea martiana (Jatobá). O estudo foi realizado no Laboratório de Microbiologia e Imunologia da UNIVASF, na cidade de Petrolina-PE. Os extratos foram preparados utilizando diferentes diluentes, sendo estes: álcool etílico absoluto e a água destilada. Em seguida, foi empregada a técnica da Concentração Inibitória Mínima (MIC) e da Concentração Bactericida Mínima (CBM). Todos os ensaios foram realizados em triplicata. A CBM média do extrato diluído em etanol foi de 358µg/µL e do extrato diluído em água destilada foi igual a 520,82µg/mL. Não houve diferença (P<0,05) quanto à inibição bacteriana para o extrato diluído em álcool etílico absoluto ou água destilada autoclavada. Ao comparar a atividade do extrato diluído em álcool etílico absoluto e a relação com a presença do gene blaZ, observou-se que os isolados negativos para o gene pesquisado apresentaram uma CBM igual a 412,3µg/mL, e, quando comparadas aos que foram positivos para o gene blaZ, que foi de 308,80µg/mL, contudo sem diferença estatística. Quanto à inibição das bactérias utilizando extrato aquoso, a atividade foi igual para as bactérias com ou sem o gene (520,82µg/mL). Desse modo, tanto o extrato diluído em álcool etílico absoluto quanto em agua destilada autoclavada demonstrou atividade antimicrobiana, sugerindo que ocorreu extração de substâncias bioativas. Em relação ao potencial antisséptico, H. martiana teve ação pareada com o cloro, contudo aquele agiu mais rapidamente, enquanto o cloro agiu de modo ideal uma hora após a aplicação; ambos os resultados destacam que o extrato etanólico bruto das folhas de H. martiana possui potencial de combate à proliferação de bactérias ambientais e infecciosas, surgindo como uma forma de prevenir a mastite.(AU)

This study aimed to evaluate the antimicrobial and antiseptic action of the crude ethanolic extract of Hymenaea martiana leaves. The study was conducted at the Laboratory of Microbiology and Immunology of UNIVASF, city of Petrolina, state o Pernambuco. The extracts were prepared using different solvents, such as absolute ethyl alcohol and distilled water. Then, Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC) techniques were used. All assays were performed in triplicate. The average of MBC extract diluted in ethanol was 358µg/mL, and the extract diluted in distilled water was equal to 520.82µg/mL. There was no difference (P<0.05) and bacterial inhibition to extract diluted in absolute ethanol or autoclaved distilled water. Comparing the activity of the extract diluted in ethanol and the relation with the presence of blaZ gene, it was observed that the negative strains for there searched gene showed a MBC equal to 412.3µg/mL in relation to those that were positive for blaZ gene, that was 308.80µg/µL, and, however, there was no statistical difference. The bacterial inhibition activity using an aqueous extract was equal for the bacteria that had or not the blaZ gene (520.82µg/mL). Thus, the extract diluted in absolute ethanol in autoclaved distilled water as demonstrated antimicrobial activity, suggesting that occurred extraction of bioactive substances. Regarding the antiseptic potential, H. martiana had the same action of chlorine, although, this acted immediately, while the chlorine action happened properly an hour after the application. Both results pointed out that the crude ethanolic extract of H. martiana leaves has potential to combat the proliferation of environmental and infectious bacteria, emerging as a way to prevent mastitis.(AU)

Epidemiología de la brucelosis caprina y ovina en la provincia de Formosa, Argentina / Epidemiology of caprine and ovine brucellosis in Formosa province, Argentina

Se realizó un estudio epidemiológico de brucelosis en 516 majadas caprinas o mixtas (caprinos/ovinos) de las 3 regiones agroecológicas de la provincia de Formosa, Argentina. Mediante las pruebas de aglutinación en placa con antígeno tamponado y de fijación del complemento en suero se estudiaron un total de 25.401 caprinos y 2.453 ovinos. Además, se realizaron cultivos bacteriológicos y PCR en muestras de leche de cabras de 3 majadas con brucelosis y abortos recientes. Se detectó brucelosis en 4 de los 9 departamentos de la provincia, la prevalencia global fue del 2 % y la intrapredial varió entre el 1 y el 40%. La proporción de majadas positivas fue del 3,6, el 12 y el 36 % para las regiones este, centro y oeste, respectivamente. Se aisló Brucella melitensis bv. 1 de cabras por primera vez en la provincia. La PCR amplificó fragmentos esperados de 827 pb correspondiente al gen omp2ab (Brucella spp.) y de 731 pb correspondiente al inserto IS711 (B. melitensis). La detección de anticuerpos en ovinos que cohabitan con caprinos sugiere que las infecciones habrían sido causadas por B. melitensis, lo que constituye un riesgo adicional para la salud pública. Los programas de control y erradicación de la brucelosis deberían considerar las majadas mixtas como una sola unidad epidemiológica. Los resultados indican que la brucelosis por B. melitensis bv. 1 es altamente endémica en las regiones centro y oeste de la provincia de Formosa.

An epidemiological study of brucellosis was carried out in 516 goats and mixed flocks (goat/sheep) from the three agro-ecological regions of Formosa province, Argentina. Serum samples from a total of 25401 goats and 2453 sheeps were analyzed using buffered plate agglutination test (BPAT) and complement fixation test (CFT). Bacteriological and PCR analyses on milk samples from goats in three flocks with a history of brucellosis and recent abortions were also performed. Brucellosis was detected in four of the nine departments of the province with an overall prevalence of 2 % and an intra-flock prevalence ranging between 1 % and 40 %. The proportion of infected flocks was 3.6 %, 12 % and 36 % for the eastern, central and western regions, respectively. Brucella melitensis bv. 1 was isolated efrom goats for the first time in the province. The expected fragments of 827 bp from the omp2ab gene (Brucella spp.) and 731 bp from the insert IS711 (B. melitensis) were amplified by PCR. Detection of antibodies by BPAT and FCT in sheep cohabiting with goats suggests that infections could have been caused by B. melitensis, posing an additional risk to public health. Control and eradication programs for brucellosis should consider mixed flocks as a single epidemiological unit. The results indicate that brucellosis by B. melitensis bv1 is highly endemic in the central and western regions of Formosa province.

Use of green fluorescent protein to monitor Lactobacillus plantarum in the gastrointestinal tract of goats

The experiment aimed to specifically monitor the passage of lactobacilli in vivo after oral administration. The green fluorescent protein (GFP) gene was cloned downstream from the constitutive p32 promoter from L. lactis subsp. cremoris Wg2. The recombinant expression vector, pLEM415-gfp-p32, was electroporated into Lactobacillus plantarum (L. plantarum) isolated from goat. Green fluorescent protein (GFP) was successfully expressed in L. plantarum. After 2 h post-administration, transformed Lactobacillus could be detectable in all luminal contents. In the rumen, bacteria concentration initially decreased, reached the minimum at 42 h post-oral administration and then increased. However, this concentration decreased constantly in the duodenum. This result indicated that L. plantarum could colonize in the rumen but not in the duodenum.

Occurrence of enterotoxin-encoding genes in Staphylococcus aureus causing mastitis in lactating goats / Ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas em Staphylococcus aureus associados a mastite em cabras em lactação

Staphylococcal enterotoxins are the leading cause of human food poisoning worldwide. Staphylococcus spp. are the main mastitis-causing agents in goats and frequently found in high counts in goat milk. This study aimed to investigate the occurrence of enterotoxin-encoding genes in Staphylococcus aureus associated with mastitis in lactating goats in Paraiba State, Brazil. Milk samples (n=2024) were collected from 393 farms. Staphylococcus aureus was isolated in 55 milk samples. Classical (sea, seb, sec, sed, see) and novel (seg, seh, sei) enterotoxin-encoding genes were investigated by means of polymerase chain reaction (PCR). From thirty-six tested isolates, enterotoxin-encoding genes were detected in 7 (19.5 percent) S. aureus. The gene encoding enterotoxin C (seC) was identified in six isolates, while seiwas observed in only one isolate. The genes sea, seb, sed, see, seg and seh were not observed amongst the S. aureus investigated in this study. In summary, S. aureus causing mastitis in goats can harbor enterotoxin-encoding genes and seC was the most frequent gene observed amongst the investigated isolates. This finding is important for surveillance purposes, since enterotoxin C should be investigated in human staphylococcal food poisoning outbreaks caused by consumption of goat milk and dairy products.

As enterotoxinas estafilocócicas são as principais causas de intoxicação alimentar em humanos em todo o mundo. O principal agente causador da mastite caprina são os Staphylococcus spp., frequentemente encontrado em altas contagens no leite caprino. Este estudo objetivou investigar a ocorrência de genes codificadores de enterotoxinas em Staphylococus aureus associados com mastite em cabras em lactação no estado da Paraíba, Brasil. As amostras de leite (n=2024) foram coletadas em 393 propriedades. Foram isolados 55 S. aureus em amostras de leite. Os genes codificadores de enterotoxinas clássicas (sea, seb, sec, sed, see) e as novas (seg, seh, sei) foram investigadas por meio de reação em cadeia de polimerase (PCR). Foram testados trinta e seis isolados, foram detectados 7 (19,5 por cento) genes codificadores de enterotoxinas de S. aureus. O gene codificador da enterotoxina C (sec) foi identificado em seis isolados, enquanto sei foi observado em apenas um isolado. Os genes sea, seb, sed, see, seg e seh não foram observados entre os S. aureus investigados neste estudo. Em síntese, a mastite caprina causada por S. aureus pode abrigar genes codificadores de enterotoxinas e sec foi o gene mais frequentemente observado entre os isolados investigados. Essa descoberta é importante para fins de vigilância e a enterotoxina C deve ser investigada em surtos de intoxicações alimentares estafilocócicas em humanos causadas pelo consumo de leite caprino e seus derivados.

Ocorrência e caracterização da tuberculose em caprinos leiteiros criados no estado de Pernambuco / Occurrence and characterization of tuberculosis in dairy goats bred in the state of Pernambuco, Brazil

Acreditou-se durante muito tempo que a espécie caprina era resistente à infecção por Mycobacterium bovis, porém tal hipótese foi desconsiderada quando relatos da enfermidade surgiram em vários países. No entanto, ainda permanecem desconhecidas certas características da tuberculose em caprinos e suas implicações na saúde pública e caprinocultura nacional. Objetivou-se com este trabalho descrever os aspectos nosológicos, radiológicos, anátomo-histopatológicos, baciloscópicos e biomoleculares da tuberculose em caprinos leiteiros com doença respiratória, naturalmente infectados e procedentes do estado de Pernambuco. Para isso foram tuberculinizadas 442 cabras com sintomas respiratórios e, destas, 3,4% (15/442) foram consideradas positivas ao teste. Dos animais positivos, sete foram monitorados clinicamente durante 12 meses, descrevendo-se os achados obtidos. O agente etiológico foi identificado através da reação em cadeia da polimerase, por amplificação de sequências genômicas do Complexo Mycobacterium tuberculosis e posteriormente de Mycobacterium bovis. Este é o primeiro diagnóstico molecular com caracterização do envolvimento do Mycobacterium bovis na tuberculose caprina no Brasil.

For a long time, it was believed that the goat species is resistant to infection by Mycobacterium bovis; however, this hypothesis changed when reports of the disease became apparent in various countries. Nevertheless, certain characteristics of tuberculosis in goats and its impact on public health are still unknown. The objective of this study was to describe nosologic, radiologic, anatomo-histopathological, bacilloscopic and biomolecular aspects of tuberculosis in dairy goats with respiratory disease naturally infected, from the state of Pernambuco, Brazil. When we tuberculinized 442 goats with respiratory symptoms, 3.4% (15/442) of these were considered positive in the test. From the positive goats, seven were monitored clinically for 12 months. The etiological agent was identified through the polymerase chain reaction, by amplification of genomic sequences of the Mycobacterium tuberculosis complex and later Mycobacterium bovis. This is the first molecular diagnosis which characterizes the involvement of Mycobacterium bovis in goat tuberculosis in Brazil.

Suscetibilidade a antimicrobianos e produção de betalactamase em amostras de Staphylococcus isolados de mastite caprina no semiárido paraibano / Susceptibility to antimicrobial drugs and production of beta-lactamase by Staphylococcus strains isolated from mastitis in goats in the semi-arid region of Paraiba state, Brazil

Este trabalho teve como objetivo avaliar a susceptibilidade antimicrobiana in vitro e a produção de betalactamase de 42 amostras de Staphylococcus isolados de mastite subclínica caprina. Foram utilizados 14 Staphylococcus chromogenes, 10 S. waneri, 6 S. saprophyticus, 5 S. aureus, 3 S. epidermidis, 2 S. intermedius e 2 Staphylococcus coagulase negativo. Os maiores índices de resistência foram para penicilina 66,67% e ampicilina 63,89% e sensibilidade frente a cefoxitina 97,62%. A múltipla resistência a 3 ou mais antimicrobianos foi observada em 42,86% dos isolados. Das 42 amostras de Staphylococcus avaliadas, 73,81% foram positivas para o teste de produção de betalactamase. A concentração inibitória mínima apresentou 100% das amostras susceptíveis à norfloxacina e os valores de resistência para os demais antimicrobianos não ultrapassaram os 30%. A alta resistência apresentada para penicilina e ampicilina demonstra a limitação no uso desses antimicrobianos no tratamento da mastite caprina na região. Embora neste estudo as cefalosporinas tenham apresentado boa sensibilidade, o uso desses fármacos em medicina veterinária se torna preocupante devido à incidência de estirpes produtoras de betalactamase.

The present study was aimed to test the in vitro antimicrobial susceptibility using disc diffusion assay and minimum inhibitory concentration (MIC) values, as well as the production of beta-lactamase of 42 strains of Staphylococcus sp. isolated from subclinical mastitis in goats in the semi-arid region of Paraiba state, in Brazil. To this end, 14 samples of negative Staphylococcus chromogenes, 10 S. waneri, 6 S. saprophyticus, 5 S. aureus, 3 S. epidermidis, 2 S. intermedius and 2 Staphylococcus were used. Regarding the in vitro susceptibility, the highest levels of resistance observed concerned penicillin (66.67%) and ampicillin (63.89%), and the greatest sensitivity observed concerned Cefoxitin (97.22%). Multiple resistance to 3 or more antimicrobial drugs was observed in 42.86% of the isolates. Of the total Staphylococcus isolated, 73.81% were positive for the beta-lactamase production test. The minimum inhibitory concentration showed 100% of the samples susceptible to norfloxacin, and the maximum resistance values to the other antimicrobial drugs were 30%. According to the results obtained, it is concluded that, in order to select the most appropriate drug to treat mastitis in goats caused by strains of Staphylococcus, the antimicrobial sensitivity profile of the strain must be known and routine laboratory tests for detecting beta-lactamase should be performed because these enzymes are disseminated both in human and veterinary medicine. The high resistance to penicillin and ampicillin demonstrates the limitation in the use of antibiotics in the treatment of mastitis in goats. Although in the present study the cephalosporines demonstrated a considerable degree of sensitivity, the use of these antimicrobial agents in veterinary medicine becomes a matter of concern due to the incidence of strains that produce betalactamase.

Aspectos epidemiológicos da tuberculose caprina na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG / Epidemiological aspects of caprine tuberculosis in the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba mesoregion, Minas Gerais, Brazil

Dados referentes à tuberculose caprina no Brasil e sua importância em saúde pública são escassos. Diante disso, este trabalho teve por objetivos investigar a ocorrência e pesquisar aspectos epidemiológicos da tuberculose em rebanhos leiteiros caprinos na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG. Foram tuberculinizados 233 caprinos provenientes de sete propriedades leiteiras, utilizando-se o teste cervical comparativo, tomando-se como referência os procedimentos e critérios de interpretação de resultados padronizados para esta espécie. Dos animais submetidos ao teste, 1,29% (3/233) reagiram positivamente, 2,14% (5/233) apresentaram reações inconclusivas e 96,57% (225/233) não reagiram. Todos os caprinos positivos e um com resposta inconclusiva foram submetidos à necropsia. Amostras de linfonodos, fígado, pulmão e rim que apresentaram alterações foram colhidos para exame histopatológico (Hematoxilina-Eosina). Material proveniente de abscessos e fragmentos de linfonodos foi submetido à cultura em meio Stonebrink e Petragnani. Um inquérito epidemiológico foi procedido para análise dos fatores relacionados à ocorrência de tuberculose nas propriedades. Não foram encontradas lesões macroscópicas sugestivas de tuberculose nos animais necropsiados, nem alterações histopatológicas. Também não houve crescimento de micobactérias na cultura. A taxa de prevalência dos caprinos foi de 1,29%. Por se tratar de rebanhos leiteiros, a ocorrência de tuberculose pode representar risco zoonótico na mesorregião do Triângulo Mineiro e Alto Paranaíba, MG. A interpretação dos registros epidemiológicos, associada aos resultados da tuberculinização,constatou reagentes positivos somente na propriedade onde se utilizou leite bovino in natura para alimentar cabritos recém-nascidos.

Data on caprine tuberculosis in Brazil and its importance for public health are scarce. Therefore, the purpose of this study was to investigate the occurrence and examine epidemiological aspects of tuberculosis in dairy goat herds in the Triângulo Mineiro and Alto Paranaíba mesoregion in the state of Minas Gerais, Brazil. Two hundred and thirty-three goats from seven dairy farms were tuberculinized using the comparative cervical tuberculin test (CCT), taking as a reference the procedures and interpretation criteria of standard results for this species. Of the animals subjected to the test, 1.29% (3/233) reacted positively, 2.14% (5/233) showed inconclusive reactions, and 96.57% (225/233) showed no reaction. All the goats that tested positive and one showing an inconclusive response were necropsied. Samples of lymph nodes, liver, lung and kidney presenting alterations were collected for histopathological examination (hematoxylin-eosin). Material removed from abscesses and lymph-node fragments were cultured in Stonebrink and Petragnani culture medium. An epidemiological inquiry was carried out to analyze risk factors on the farms. The necropsied animals did not exhibit macroscopic lesions suggestive of tuberculosis or any histopathological alterations, nor did the cultures show Mycobacterium sp. growth. The goats' prevalence rate was 1.29%, which may represent a zoonotic risk in this mesoregion since these are dairy herds. The interpretation of the epidemiologic records, allied to the results of the tuberculinization procedure, indicated positive reagents only on a farm where fresh cow milk was fed to newborn goat kids.

Tuberculose em caprinos do semiárido brasileiro / Tuberculosis in goats from a semiarid region in Brazil

No período de janeiro a outubro de 2007, foram tuberculinizadas 1.866 fêmeas caprinas de diferentes raças e idades distribuídas em 84 propriedades da microrregião de Monteiro, semiárido da Paraíba. Nove cabras (0,48%) foram positivas, duas delas foram sacrificadas e, à necropsia foram observadas lesões sugestivas de tuberculose nos pulmões e no fígado. No exame histopatológico, foram evidenciados granulomas típicos. Foi procedido o cultivo e isolamento de micobactérias, sendo observado o crescimento do agente no meio de cultura de Stonebrink a partir de 36 dias de incubação, com um tempo médio de crescimento de 42 dias. Também foram encontrados resultados positivos na pesquisa de bacilos álcool-ácido resistentes (BAAR) pela coloração de Ziehl-Neelsen. O cultivo de Corynebacterium pseudotuberculosis foi negativo. O presente relato, com isolamento e visualização do agente, bem como verificação de lesões macro e microscópicas, é o primeiro caso de tuberculose confirmado em caprinos do semiárido brasileiro.

From January to October 2007, 1,866 female goats of different breeds and ages from 84 herds of the Monteiro microregion, in a semiarid area of Paraíba State, Brazil, were tuberculinized. Nine goats (0.48%) were positive and two of them were slaughtered, and at necropsy tuberculosis-like lesions were found in lungs and liver. At the histopathologic examination, typical tuberculosis granulomas were observed. Micobacteria culture and isolation were carried out, and there was growth of the agent on the Stonebrink medium culture from 36 days of inoculation with an average growth time of 42 days. Positive results were also found in the research of acid-fast bacilli by Ziehl-Neelsen staining. The culture of Corynebacterium pseudotuberculosis was negative. This report, with isolation and visualization of the agent, as well as verification of gross and microscopic lesions, is the first confirmed case of tuberculosis in goats of a semiarid region of Brazil.

The pattern of distribution of pneumonic consolidation in experimental peste des petits ruminants virus (PPRV) and/or Mannheimia Hemolytica Infection in West African dwarf goats / Patrón de distribución de la consolidación pneumónica en infección experimental con virus peste des petits ruminants (PPRV) y/o mannheimia hemolítica en cabras enanas del Oeste Africano

The study into the pattern of distribution of the lung consolidation associated with common viral and bacterial pneumonia and their co-infection in subsaharan goats is scanty in literatures. Fifty apparently healthy West Africa Dwarf goats (WAD) six months of age were used for the experiment. The animals were divided into groups A, B, and C with 15 goats each while 5 goats served as control. Group A goats infected with 1ml of pure culture (1 X 109 CFU) of Mannheimia haemolytica MH A2, while group B with 1ml of pure cultured 106.5 TCID50 PPR virus grown in Baby hamster kidney cell lines and group C with 1 ml of PPRV and a week later 1ml of MH A2. The degree of consolidation or pneumonia as a percentage of the total lung volume was determined by visual observation, palpation and measurement of the lesion which is estimated as a percentage of each lobe. Student t-test were used to test for significant differences. The right lungs have a higher lung consolidation percentage than the left in all the treatment groups. The accessory lobe was affected in the PPRV group. The MH group has the highest lung consolidation percentage (10.1 percent). The PPRV 1-28dpi has the lowest consolidation percentage (1.06 percent). There is significant difference in the consolidation percentage and mortality between MH, PPR+MH, PPRV 28-45 dpi and PPRV 1-28dpi (P<0.05). This observation further show that the right lung and the anterior lobes were more affected in experimental viral and bacterial respiratory pathogen and their co-infection as the trachea birfucation is first to the right and the distance between the right and the left birfucation was 1.5 +/- 0.35cm. It is the first study that describes and compare the pattern of distribution and morphometry of pneumonia in experimental PPRV, MH and PPRV+MH infections in goats.

El estudio sobre el patrón de distribución de la consolidación pulmonar asociada con neumonía virales y bacterianas comunes y sus co-infección en cabras Subsaharianas, es escasa en la literatura. Cincuenta cabras enanas de África occidental (WAD) aparentemente sanas de seis meses de edad fueron utilizados para el experimento. Los animales se dividieron en grupos A, B y C con 15 cabras cada uno mientras que el 5 cabras sirvió como control. Grupo A cabras infectadas con 1 ml de cultivo puro (1 X 109 UFC) de Mannheimia haemolytica MH A2, mientras que el grupo B con 1 ml de cultivo puro 10 6,5 DICT50 PPR cultivado en líneas celulares de riñón de crías de hámsters y el grupo C con 1 ml de PPRV y un semana después de 1 ml de MH A2. El grado de consolidación o neumonía como porcentaje del volumen pulmonar total se determinó por observación visual, palpación y la medición de la lesión que se estima como un porcentaje de cada lóbulo. El test t de Student se utilizaron para probar las diferencias significativas. El pulmón derecho tiene un porcentaje de consolidación pulmonar superior a izquierdo en todos los grupos de tratamiento. El lóbulo accesorio se vio afectado en el grupo de PPRV. El grupo MH tiene el porcentaje más alto de consolidación pulmonar (10,1 por ciento). El PPRV 1-28dpi tiene el menor porcentaje de consolidación (1,06 por ciento). No hay diferencia significativa en el porcentaje de consolidación y la mortalidad entre MH, MH + PPR, PPRV 28-45 dpi y PPRV 1-28dpi (P <0,05). Esta observación muestra además que el pulmón derecho y los lóbulos anteriores se vieron más afectados en infecciones respiratorias patógenas experimentales con agentes virales y bacterianos y su co-infección como la bifurcación traqueal es primero a la derecha y la distancia entre la derecha y la bifurcación izquierda fue de 1,5 +/- 0,35 cm. Es el primer estudio que describe y compara el patrón de distribución y la morfometría de las neumonías en PPRV experimentales, MH y MH + PPRV...

Perfil microbiológico, celular e fatores de risco associados à mastite subclínica em cabras no semiárido da Paraíba / Cellular and microbiological profiles and risk factors for subclinical mastitis in goats in the semi-arid region of Paraíba

Foi realizado um estudo da mastite subclínica em nove rebanhos de cabras leiteiras no semiárido paraibano com o objetivo de determinar a ocorrência da infecção, avaliar o perfil microbiológico e celular do leite, testar a sensibilidade dos microorganismos isolados frente a antimicrobianos além de identificar os fatores de risco. Foram utilizadas 131 cabras leiteiras das quais foram colhidas 261 amostras de leite para exame microbiológico e 131 para contagem de células somáticas (CCS). Na ocasião das colheitas foi realizado o California Mastitis Test (CMT) e aplicado um questionário epidemiológico por propriedade. Houve crescimento bacteriano em 30 amostras (11,49 por cento) com 25 (83,33 por cento) dos isolados identificados como Staphylococcus coagulase negativa e cinco (16,66 por cento) Staphylococcus aureus. A média de CCS foi de 1,39x10(6) células/ml. O CMT apresentou baixa sensibilidade (46,7 por cento) e baixa especificidade (60,6 por cento) quando comparado ao exame microbiológico. A gentamicina e a associação da neomicina, bacitracina e tetraciclina foram os antimicrobianos contra os quais os microrganismos isolados apresentaram 100 por cento de sensibilidade. Penicilina e ampicilina foram os de maiores índices de resistência (66,67 por cento e 63,89 por cento, respectivamente). A caprinocultura não ser a atividade principal da propriedade e o não isolamento de animais doentes, foram identificados como fatores de risco para a mastite subclínica caprina nas propriedades estudadas. Programas de controle e profilaxia da mastite devem ser implementados enfocando as medidas de higiene na ordenha e correção dos fatores de risco identificados nesse estudo.

A subclinical mastitis study was conducted in nine dairy goat herds in the semi-arid region of Paraíba state, Northeastern Brazil, to determine the occurrence of infection, to evaluate microbiological and cellular profiles of the milk, to test the sensitivity of isolated microorganisms to antimicrobials, and to identify risk factors. One hundred thirty-one dairy goats were used, 261 samples were collected for microbiological culture and 131 samples for somatic cells count (SCC). During collection, the California Mastitis Test (CMT) was conducted and an epidemiological questionnaire was applied for each herd. There was bacterial growth in 30 samples (11.49 percent), with 25 (83.33 percent) coagulase-negative Staphylococcus and five (16.66 percent) Staphylococcus aureus isolated. The SCC mean was 1.39x10(6) cells/ml. CMT presented low sensitivity (46.7 percent) and low specificity (60.6 percent) compared with microbiological culture. Gentamicin and the association of neomycin, bacitracin and tetracyclin were the antimicrobials against which the microorganisms isolated showed 100 percent sensitivity. Penicillin and ampicillin had the greatest resistance rates (66.67 percent and 63.89 percent, respectively). Goat breeding is not the main activity on the farms and do not isolate diseased animals were identified as risk factors for caprine subclinical mastitis. Program for the control and prophylaxis of mastitis must be implemented focusing primarily on hygiene cares at milking and correction of the risk factors identified in this study.